Hughes AJ, Spelke DP, Xu Z, Kang CC, Schaffer DV, Herr AE. Single-cell western blotting. Nat Methods. 2014 Jul;11(7):749-55. doi: 10.1038/nmeth.2992. Epub 2014 Jun 1. PMID: 24880876; PMCID: PMC4077215.
Time:
Nov 06,2023
支持 30μm 厚光敏聚丙烯酰胺凝膠的顯微鏡載玻片可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)印跡：將單個(gè)細(xì)胞沉降到微孔中，原位裂解，凝膠電泳，光誘導(dǎo)印跡以固定蛋白質(zhì)和抗體探測(cè)。我們應(yīng)用這種 scWestern 方法來監(jiān)測(cè)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的單細(xì)胞分化和對(duì)有絲分裂原刺激的反應(yīng)。即使與脫靶抗體結(jié)合，scWestern 也定量了靶蛋白，多路復(fù)用到每個(gè)單個(gè)細(xì)胞的 11 個(gè)蛋白靶標(biāo)，檢測(cè)閾值為<30，000 個(gè)分子，并且在與 FACS 集成時(shí)支持低起始細(xì)胞數(shù)的分析。
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