單細(xì)胞western的實(shí)驗(yàn)步驟有哪些?
基本步驟如下:
第一步:將組織樣本制成單細(xì)胞懸液;
第二步:將單細(xì)胞懸液滴加在芯片上,靜置十分鐘左右,在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞落孔情況;
第三步:將芯片放置于MONO-X1一體機(jī)的電泳槽內(nèi),設(shè)置實(shí)驗(yàn)條件,添加特制緩沖液,運(yùn)行儀器,約10-15分鐘;
第四步:芯片取出,進(jìn)行一抗二抗孵育;
第五步:利用熒光掃描儀或者共聚焦顯微鏡采集信號(hào),信號(hào)采集后若需再次孵育,則洗脫重孵育,再采集信號(hào);
第六步:利用智能分析軟件進(jìn)行分析。
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